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使用高速離心機分離生物大分子
生物大分子包括核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。它們是一切生物機體形態(tài)結構和功能發(fā)揮zui重要的物質(zhì)基礎,其分子量巨大、分子結構復雜,分子中包含有生命活動(dòng)的基本信息。近年來(lái)分子生物學(xué)研究的理論和實(shí)踐飛速發(fā)展。特別是功能基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研究在揭示生命現象本質(zhì)中發(fā)揮著(zhù)空前的積極作用。
HR/T16M臺式高速冷凍離心機
離心過(guò)程中,樣品體積大,沉降路徑長(cháng),要相應增加離心轉速或延長(cháng)離心時(shí)間。樣品體積小,靠近離心管底部受到的離心力大,要相應降低離心轉速或縮短離心時(shí)間??捎肒值近似確定離心轉速和時(shí)間。
這些研究首先要從動(dòng)、植物組織或微生物組織中獲取相應的目標分子,離心技術(shù)為實(shí)現這一目的提供了一種zui為經(jīng)濟可靠的技術(shù)手段。由于任何生物大分子都是以不同的形式與其他分子結合在一起的,例如DNA與組蛋白或非組蛋白結合,所以分離時(shí)首先要根據大分子與其他分子的結合形式和特點(diǎn)選擇合適的介質(zhì)和方法破壞組織或細胞,再選擇萃取試劑從混合物里把大分子抽取出來(lái),zui后用生物學(xué)和物理學(xué)方法進(jìn)行純化。離心法通常根據沉降速度不同用速率區帶分離,或根據浮力密度不同在不同類(lèi)型的梯度溶液中用等密度法分離。3H20RI智能高速冷凍離心機
臺式冷凍水平轉子離心機分離生物大分子概述
大多數分析和小規模制備生物大分子首選是臺式冷凍水平轉子離心機,它能產(chǎn)生強大的離心力,生物大分子在水平轉子的離心管中有較長(cháng)的沉降路徑,壁效應較小,可使生物大分子獲得精確分離。為獲得zui佳分辨率,樣品體積不應超過(guò)梯度體積的3%,梯度上的樣品區帶應該非常窄。
離心管尺寸和轉速不同,分離效果不同。小劑量樣品可用細長(cháng)型離心管,大容量樣品可用粗短型離心管,它們都可使樣品區帶盡可能窄。然而,為了提高分辨率一味增加生物大分子的沉降路徑,會(huì )使離心時(shí)間延長(cháng)。在此過(guò)程中,有些蛋白質(zhì)會(huì )失去活性。隨著(zhù)沉降時(shí)間的延長(cháng)引起的擴散,會(huì )導致區帶變寬。
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